如何使实验结果具有可比性

   |    2016年4月19日  |   文章  |    0 条评论  |    1739

看一个实例,学习如何使不同批次的实验结果具有可比性

转自【流式中文网】

很多FLOWER无论是做科研还是临床的检测,定性的还好,一旦涉及到定量,尤其是定平均荧光强度(MFI)的,就十分苦恼:在不同的时间、不同的稳定,流式细胞仪的状态有可能会变;在不同次的检测中,或许会对电压和补偿进行微调,甚至不同次数中,即使保存相同的电压,有时候相同类型的标本MFI也可能会发生轻微变化。那么,苍天,我怎么才能使得不同次的实验结果具有可比性呢。
2016年三月份的Oncology Letters上一篇文章给了我们一些启示,可借助冻存的PBMC标本。该文章是研究头颈部肿瘤中T细胞中ζ链的表达强度变化,既需要比较肿瘤病人和健康人的MFI差异,还需要监测不同时间点的MFI变化。这就对结果的稳定性要求很高。如果直接用散点图上读取出来的MFI数据进行比较,发现肿瘤病人和健康人之间ζ链的MFI没有差异,但如果引入了内对照(即用健康人外周血提取PBMC,然后分成多管冻存,每次检测拿出一小管复苏检测ζ链MFI),计算Transformed MFI(即测试样本直接读取出的T细胞ζ链MFI 除以 内对照的T细胞ζ链MFI),该比值就很明显地看出肿瘤患者T细胞ζ链表达强度低于健康人(见图1):

 
图1、左侧是转换前的MFI直接比较,肿瘤患者和健康人之间T细胞ζ链MFi没有差异,右侧是转换后的,很明显的统计学差异。

并且纵向(不同时间跟踪监测)检测也保持了很高的稳定性,见图2:

 
图2、左侧图是不同时间点肿瘤病人的监测情况,IC为内对照MFI,P为病人MFI,可见变化很大,如果进行转化后,不同时间点的结果就具备了可比性。

这个方法,是不是给正在苦恼如何使不同时间的实验结果具有可比性的你带来了一线光明呢?有的话请留言点赞,分享给朋友们吧:)

参考文献

UPRETI D, PATHAK A, KUNG SKP. Development of a standardized flow cytometric method to conduct longitudinal analyses of intracellular CD3ζ expression in patients with head and neck cancer. Oncology Letters. 2016;11(3):2199-2206. doi:10.3892/ol.2016.4209.

 

回复 取消